Une méthode pour préparer du phosphate de dihydroxyacétone (DHAP) comprenant le traitement de dihydroxyacétone avec de la phosphatase acide bactérienne en présence de pyrophosphate. L'invention concerne également une méthode pour faire, de préférence en une fois, de manière stéréospécifique un composé de formule : R-C*H(OH)-C*H(OH)-CO-CH2-OH comprenant les étapes : a) traitement du dihydroxyacétone avec de la phosphatase acide bactérienne en présence du pyrophosphate pour préparer le phosphate de dihydroxyacétone ; b) traitement du phosphate de dihydroxyacétone avec un R-CHO et une aldolase, où R est un groupe alcoyle et un C * un atome de carbone chiral en phosphate de formule : R-C*H(OH)-C*H(OH)-CO-CH2-OPO3H2 ; et c) déphosphorylation du phosphate de l'étape b) en traitant ledit phosphate avec de la phosphatase acide bactérienne.