Selon l'invention, on effectue une hydrolyse régiosélective et chimiosélective d'un groupe alpha -ester d'un diester d'acide aminé, à l'aide d'une estérase de foie de porc. Les diesters d'acides aminés peuvent être soit N-protégés, soit non protégés, et les groupes diesters peuvent être semblables ou différents. On décrit notamment la préparation d'un certain nombre de gamma -ester glutamates et de beta -esters aspartates.