Procédé perfectionné pour préparer du méthane à partir d'une matière organique, par exemple du fumier, à l'aide d'une culture de micro-organismes anaérobies, de préférence thermophiles, par contact de la matière organique avec les micro-organismes dans une chambre d'où l'on recueille les gaz produits. La matière organique est introduite au préalable dans une autre chambre équipée de dispositifs de chauffage et dans laquelle elle est portée à une température appropriée pour la production de gaz, par exemple à une température de 50 à 60 degrés C, avant d'être transportée dans la chambre de traitement proprement dite où elle entre en contact avec la culture de micro-organismes. Le procédé selon l'invention permet d'accélérer le processus biologique conduisant à la formation de méthane.